安捷倫：茶葉世界探秘：發(fā)現 D-型氨基酸 

       近期，安徽農業(yè)大學茶樹生物學與資源利用國家重點實驗室宛曉春和楊小根研究團隊在《食品化學》雜志（Food Chemistry）上發(fā)表了一篇題為“茶葉中 D 型氨基酸的鑒定”的論文(Identification of D-amino acids in tea leaves)。初步研究表明，在茶葉中可檢測到 11 種 D 型氨基酸異構體，且茶葉中氨基酸的消旋與加工方法和儲存時間有關聯。以下簡單介紹這篇論文的內容與展望。

       研究目標：

       建立茶湯中19種蛋白質氨基酸以及茶氨酸對映異構體的富集、非衍生拆分、同時鑒定檢測的方法；驗證茶葉中存在 D 型氨基酸的假說并探尋茶葉加工儲存過程與氨基酸對映異構化的關系。

       主要分析儀器：

       安捷倫高效液相色譜與 6545 高分辨四極桿飛行時間液質聯用系統(tǒng)（LC/Q-TOF)

       研究途徑：

       茶湯中的游離氨基酸通過離子交換固相萃取，富集后的氨基酸經手性液相色譜拆分 20 對氨基酸對映異構體，然后由 6545 LC/Q-TOF 進行質譜檢測，對被測化合物同時進行全掃描和子離子掃描，以達到定性鑒定和定量測定在同次分析中完成。分析了 19 種茶葉樣品的氨基酸異構體，研究不同加工工藝、不同存儲時間與 D-和 L-氨基酸濃度的關系。

       研究成果：

       1）建立了 D 型氨基酸的分析方法。其特點是通過離子交換富集純化茶湯中的氨基酸，利用手性色譜對非衍生氨基酸對映異構體的拆分和質譜對不同氨基酸的分辨能力，同時分離鑒定氨基酸對映異構體

       2）驗證茶葉中含有 D 型氨基酸的假說。對 19 種茶葉樣品的氨基酸對映異構體的檢測表明，茶鮮葉中僅發(fā)現 L 型氨基酸，未發(fā)現 D 型氨基酸。而加工后的茶葉樣品中共檢測到11種D型氨基酸，其含量范圍跨度大，從痕量到 43  µg/g。研究結果證明了茶葉中含有 D 型氨基酸的假說的成立。

       3）茶葉加工條件以及儲存時間與氨基酸異構化的關系。對不同年份的白牡丹、大紅袍和祁門紅茶的研究表明，茶葉加工儲存條件對氨基酸的消旋以及降解程度有直接關系。D-氨基酸的濃度和 D/L 比通常隨著陳化時間而增加；在相同條件下，不同種類的氨基酸消旋化程度不同；黑茶的加工過程對氨基酸的消旋反應有較大影響，這很可能與黑茶渥堆發(fā)酵時的微生物作用有關。

       結論：

       借助手性色譜柱與安捷倫高效液相色譜/高分辨四極桿飛行時間液質聯用系統(tǒng) (UHPLC/Q-TOF)，建立了 20 對氨基酸對映異構體有效拆分與檢測方法；驗證了茶葉中存在D型氨基酸；研究初步表明氨基酸在茶葉中的消旋和降解程度與加工和儲存條件有直接關系。該研究為探尋茶葉變化的標識參數提供了新思路。