導(dǎo)言

紫外可見分光光度計在藥廠有著廣泛的應(yīng)用，根據(jù)藥典通則0401《紫外-可見分光光度法》規(guī)定，企業(yè)需要定期校驗紫外—可見分光光度計，校驗內(nèi)容主要包括了波長準(zhǔn)確度、吸光度準(zhǔn)確度和雜散光三個檢驗項目，有些客戶自己校驗時會失敗，而這三個項目中又以吸光度準(zhǔn)確度測試失敗率最高。

藥廠小伙伴一般是使用重鉻酸鉀溶液校驗紫外可見分光光度計，準(zhǔn)確稱量和配制一般難不住大家，但是有些小細(xì)節(jié)如果不注意會導(dǎo)致校驗的失敗，下面介紹一下吸光度準(zhǔn)確度測試的注意點：

01實驗室溫度

藥典中并沒有明文規(guī)定校驗時的實驗室溫度，正常情況下校驗應(yīng)該是在20℃下進(jìn)行的，那么溫度對溶液的吸光度有影響嗎？根據(jù)《JJG 178紫外可見近紅外分光光度計》的數(shù)據(jù)，60mg/L重鉻酸鉀溶液在235nm下，10℃時透過率為18.0%換算為吸收系數(shù)是124.1，而30℃時透過率為18.3%換算吸收系數(shù)為122.9，而235nm處允許的吸收系數(shù)為123.0-126.0，在30℃時本身就已經(jīng)不滿足校驗要求了，所以溫度這一點一定要特別注意。

02比色皿的使用

實驗需要使用潔凈的比色皿，對于有污垢的比色皿可以使用洗液浸泡，確保表面無劃痕。按照一般的實驗要求，使用待測溶液潤洗三次以上就可以認(rèn)為消除了比色皿殘留溶劑的影響，而實際上在進(jìn)行儀器校驗時，潤洗的要求會高很多，根據(jù)實驗，進(jìn)行6次以上的潤洗可以比較可靠的保證潤洗效果。同時由于比色皿兩個通光面的光學(xué)性能不一定完全一致，在使用比色皿時，要注意調(diào)零和測試時比色皿通光面的方向不能改變。

03比色皿的選擇

目前的紫外可見分光光度計都是雙光路的儀器，本身可以消除參比光路和樣品光路的皿差，所以大家使用時并沒有特別注意比色皿的選擇，但是進(jìn)行儀器校驗時，比色皿通光面材料的不均勻性、比色皿本身透過率的誤差、比色皿尺寸的誤差等都會導(dǎo)致校驗不通過，建議使用質(zhì)量較好配對的比色皿（比色皿配對要求可參考《JJG 178紫外可見近紅外分光光度計》4.10吸收池的配套性）。

04比色皿架

比色皿架起到固定比色皿的作用，而對于一些使用時間比較久的儀器，比色皿架的定位簧片（下圖所示）已經(jīng)老化了，起不到固定比色皿的作用，這樣在測試時會導(dǎo)致光通過比色皿的不同位置，將比色皿本身不同位置透過率的誤差帶入到結(jié)果中，在校驗時也需要注意這個影響。

05試劑

重鉻酸鉀有不同的試劑等級，建議選用優(yōu)級純或者基準(zhǔn)級試劑，以避免由于試劑雜質(zhì)影響導(dǎo)致計量不通過。重鉻酸鉀保存時保持密封、干燥以防受潮，而且保存和配制的時候盡量避光。

另外如果具備條件，建議考慮直接購買具有證書的配制好的重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液，避光保存，開封后四小時內(nèi)使用，這樣可以消除試劑和配制帶來的影響。

以上就是紫外可見分光光度計吸光度準(zhǔn)確度校驗時容易忽視的一些小細(xì)節(jié)，把握好這些小細(xì)節(jié)，同時再配以島津一流的分光光度計，大家在紫外校驗的路上一定能順利達(dá)到目標(biāo)。